เทคนิคพื้นฐานทางอณูชีววิทยา

การสกัด DNA (DNA Extraction)

คือการสกัดเอา DNA ซึ่งส่วนใหญ่ (99%) อยู่ภายใน nucleus ของเซลล์ออกมา เพื่อนำมาใช้ศึกษาในสิ่งที่ต้องการต่อไป เราสามารถจะสกัดสารพันธุกรรม (DNA) ได้จากตัวอย่างเนื้อเยื่อหรือเซลล์ทุกชนิด แต่จะต้องเป็นเซลล์ที่มี nucleus เท่านั้น โดยทั่วไปนิยมสกัด DNA จากตัวอย่างเลือด (5-10 ml) หรือจากเนื้อเยื่อที่ต้องการตรวจอื่นๆ เช่น กล้ามเนื้อ, ผิวหนัง เป็นต้น

การสกัด DNA ของเซลล์ทำได้โดยนำเนื้อเยื่อนั้นมาตัดให้เป็นชิ้นที่เล็กที่สุดเท่าที่จะทำได้ จากนั้นนำมาย่อยด้วยเอนไซม์ proteinase K และ sodium dodecyl sulfate (SDS) ซึ่งทำให้เยื่อหุ้มเซลล์ และเยื่อหุ้ม nucleus แตกออก DNA จะถูกปล่อยออกจาก nucleus มาอยู่ในสารละลายนั้น จากนั้นนำสารละลายมาปั่น เพื่อแยกเอาเศษของเซลล์ออก DNA จะละลายอยู่ในส่วนน้ำ หลังจากนั้นจึงนำมาตกตะกอนด้วยเกลือและ alcohol ต่อไป